雞**瘤細(xì)胞
貨號 KL-009
簡稱 DT40
細(xì)胞數(shù) 1×106
規(guī)格 1ml/T25
價格 詢價
雞**瘤細(xì)胞注意事項：
1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細(xì)描述 Description
細(xì)胞介紹
DT40是來自Hyline SC雞法氏囊**細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的。原始**瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生１天的小雞得到。法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后，建立了DT40細(xì)胞株。 這株細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表達(dá)的c-myc RNA水平較高。它缺少一個正常c-myc基因，但含有兩個拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。這株細(xì)胞保留了重排**球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。 在IgL位點(diǎn)，DT40包含一個重排和一個胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細(xì)胞株中都能誘導(dǎo)組織相容性(MHC)II類抗原表達(dá)。v-rel 誘導(dǎo)的MHCII表達(dá)比c-rel誘導(dǎo)快，且其有效性在數(shù)周后達(dá)到c-rel的50倍。這株細(xì)胞呈**母細(xì)胞表型。傳染性檢測表明DT40釋放低水平的傳染性RAV-1。這株細(xì)胞可以用于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究。
細(xì)胞特性
1） 來源：雞**瘤
2） 形態(tài)：**母細(xì)胞
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、**、酵母和**檢測為陰性
5） 規(guī)格：T75瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存：使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途：僅供科研使用。
雞**瘤細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號12800017，添加NaHCO3 1.5g/L，0.05mM β-巰基乙醇)，85%；上等胎牛血清，10%，雞血清，5%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：雞**瘤細(xì)胞如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：雞**瘤細(xì)胞可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項：
1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要**后方能丟棄。
